Kit Biologia 8 - DNA

*OBS: no kit estão só os materiais da etapa de EXTRAÇÃO.

Descrição: O kit conta com uma experiência sobre o DNA, que é dividida em 4 etapas (extração, estrutura, duplicação e transcrição), onde o objetivo é conhecer cada processo desde a extração até a transcrição do DNA, com atividades que envolvem a montagem de uma molécula de DNA e permitem entender como funciona cada componente enzimático dos processos.

Materiais:

EXTRAÇÃO

• 1/4 de cebola grande e/ou 1/3 de banana e/ou 1 morango;

• 01 faca de cozinha;

• 01 potinho graduado;

• 01 coador de chá;

• 01 pilão plástico;

• 02 tubos de 50 mL com tampa;

• 01 colher de chá;

• 01 potinho dosador;

• 01 pote plástico grande para manter o álcool gelado;

• Gelo;

• Água quente (60°C);

• 01 pano para limpeza;

• 20 mL de álcool etílico 90O gelado (a cerca de 10°C);

• 10 mL de solução de lise (água + detergente + sal de cozinha);

Orientação ao professor: Os alunos deverão responder a questão prévia individualmente e por escrito antes de iniciar a atividade. No final, o professor deverá discutir novamente a questão com os alunos.

Questões prévias:

EXTRAÇÃO

É provável que você tenha visto na mídia que, hoje em dia, é muito fácil fazer um teste de paternidade e obter resultados confiáveis, ou que o mapeamento e seqüenciamento do genoma humano pode “abrir portas” para a cura de muitas doenças. Para ter acesso a todas as informações contidas no DNA, o primeiro procedimento a ser realizado é seu isolamento. A técnica de isolamento foi desenvolvida há mais de 50 anos e foi a partir dela que os cientistas conseguiram desvendar a estrutura da molécula de DNA em 1953. Mas onde o DNA está presente e como podemos isolá-lo?

Roteiro para laboratório:

EXTRAÇÃO

• Retirar a casca da cebola e cortá-la em pedaços bem pequenos. No caso da banana fazer o mesmo. Quanto ao morango retirar apenas as folhas do ápice e cortar em pedaços;

• Macerar os pedaços com auxílio do pilão até formar uma pasta. Se necessário acrescentar uma quantidade mínima de água;

• Com o auxílio da colher colocar o macerado na peneira apoiada sobre o potinho dosador e pressionar contra a malha, de modo a peneirar o material;

• Usar o potinho graduado para colocar 10 mL de solução lise no tubo de 50 mL e adicionar em seguida ao mesmo tubo 10 mL do caldo peneirado;

• Tampar o tubo e movimentá-lo suavemente, evitando a formação de espuma, até que o caldo se misture com a solução de lise;

• Colocar o tubo na vasilha com água fervendo e deixar em banho-maria por 15 minutos. Em uma única vasilha deverão ser colocados os tubos de todos os grupos;

• Retirar o tubo da água quente e adicionar lentamente, com o auxílio do potinho graduado, 20 mL de álcool etílico gelado, deixando escorrer pela parede do tubo;

• Observar o aparecimento do aglomerado de DNA como uma “nuvem” branca na fase alcoólica.

• Caso ainda não seja possível a visualização, misture delicadamente a amostra e aguarde 5 minutos;

• Com o auxílio da colher de chá, retirar o aglomerado filamentoso de DNA da solução.

Informações Científicas

• A molécula de DNA é constituída por subunidades denominadas nucleotídeos. Cada nucleotídeo, por sua vez, é formado por 3 grupamentos químicos: (1) fosfato, (2) açúcar e (3) base nitrogenada;
• O açúcar do DNA é uma pentose chamada desoxirribose;
•  As bases nitrogenadas podem ser de quatro tipos: adenina (A), timina (T), citosina (C) e guanina(G);
•  As bases nitrogenadas são hidrofóbicas (não possuem afinidade com a água);
•  Em uma molécula de DNA, a quantidade de bases T é igual à quantidade de bases A e a de bases C é igual à de bases G;
•  No DNA, o fosfato só se liga ao açúcar;
• Os fosfatos têm carga negativa;
• A molécula é helicoidal (em formato de hélice), formada por duas cadeias de nucleotídeos antiparalelas (dispostas em direções opostas).

Perguntas sobre o experimento para os alunos responderem:

EXTRAÇÃO

1. Por que o material precisa ser macerado para isolar o DNA?

2. Qual o papel do detergente presente na solução de lise no processo de extração do DNA?

3. De que é composta a molécula de DNA?

4. Visto que o DNA não é solúvel em álcool, o que ocorre com suas moléculas quando colocadas neste meio?

5. Responda novamente a questão prévia e compare com a resposta dada antes de realizar esta atividade.

Materiais complementares:

Manual do professor

Roteiro do aluno